AIDS-vaccin onderzoek bijeenkomst van de werkgroep

introductie

Immuunrespons tegen Persistent Antigen

Dr. Barton Haynes, directeur van het Human Vaccin Instituut, verwelkomde de deelnemers aan de vergadering en kondigde drie nieuwe leden werkgroep: Dr. Susan Buchbinder, Dr Ian Wilson en Dr. Joseph Sodroski (niet aanwezig). Dr. Haynes verklaarde dat deze vergadering zal zich richten op de toestand van de vector onderzoek, het onderzoeken van de huidige vector onderzoek pijplijn, het evalueren van lacunes in het onderzoek, en het bepalen of bepaalde vectoren moeten krijgen meer onderzoek nadruk.

Dr. James Bradac van het Nationaal Instituut voor Allergie en Besmettelijke Ziekten (theernment) verklaarde dat de bijeenkomst zou ook vector persistentie en de financiering van nieuwe vector-onderzoek te overwegen. Dr. Bradac beoordeeld aspecten van het vaccin strategieën en beursgenoteerde onderzoeksgebieden momenteel gefinancierd. Hij moedigde de deelnemers aan de vergadering na te gaan hoe de vele vectoren stapel met betrekking tot de immuunrespons veiligheid, reeds bestaande immuunrespons, maximale inzet grootte, het niveau van antigeen expressie, en nog veel meer. Er is behoefte aan persistentie definiëren en bewijsstukken die persistentie leidt tot sterke, duurzame immuunrespons. Dr. Bradac moedigde de AVRWG leden om prime / boost modaliteiten, het gebruik van head-to-head vergelijkende studies te overwegen, en of het veld krijgt ruime steun.

Adeno-geassocieerde virusvectoren

Dr Rafi Ahmed, Emory Vaccin Center; Rafi Ahmed gepresenteerd recente gegevens van zijn laboratorium met betrekking tot de oprichting van humorale en cellulaire geheugen met behulp van het muismodel van besmetting met LCMV.

Herpesvirus type 1 en 2 vectoren

Homing receptoren werden alleen uitgedrukt op effector cellen gevonden in de milt, lies en mesenterische LN.

Experiment 2. adoptieve overdracht naïef, effector, of het geheugen transgene CD8 T-cellen om naïeve muizen en oogst IEL 16u post-overdracht .; Alleen effector cellen die mucosale homing markers te uiten bleken te migreren naar darmslijmvlies .; Conclusie: Mucosale immunisatie beste voor het induceren van mucosale immuniteit maar effector cellen in de milt ook in staat homing weefsel gut

Gamma Herpesvirus Vectoren

Goldilocks model- geheugen CD8 T-celdifferentiatie; Dit model stelt voor dat “precies goed” hoeveelheid antigeen sterkte / signaal en duur is nodig om de maximale T-cel fitness en het geheugen te houden.

Tijdens een chronische infectie virus-specifieke CD8 + T-cellen niet hoofd geheugen-T-cellen te langdurig antigen-onafhankelijke persistentie verwerven.

Rabiësvirus Vectoren

Andere voorbeelden omvatten HIV, HCV, HBV

Experiment. Vergelijk levende virale infectie (LCMV) vs DNA immunisatie voor het geheugen, rappel, en bescherming.

Prime TCR transgene dieren met DNA (LCMV gp33) of LCMV infectie

Op vier maanden overdracht gelijke aantallen P14TCR tg T-cellen van geïmmuniseerde muizen in naïeve muizen en boost / uitdaging rVVgp33 en meet tetrameer positieve cellen (figuur 1) voor het terugroepen respons of maatregel challenge virus titers in de eierstokken voor bescherming.

Referenties

Dr. Philip Johnson, Children’s Hospital van Philadelphia

Dr. Johnson beschreef de biologie, genomische structuur en virusdeeltje structuur van AAV. De AAV vector is verstoken van elke AAV sequenties behalve ongeveer 400 nucleotiden omgekeerde herhalingssequenties aan beide uiteinden. Zijn AAV vector bevat de CMV-promoter en poly (A) signaalsequenties. Hij toonde aan dat de vectoren zijn zeer efficiënt DNA transportmiddel voor transductie van zowel zelf-genen (voor gentherapie) en niet-eigen genen (voor vaccins).

Drie SIV vaccins zijn gebouwd: SIV rev-gag-PR-ΔRT-RRE, SIV rev-env en SIV RT-IN. Experimentele resultaten tonen aan dat de SIV rAAV vaccins wekken antigeen-specifieke humorale en cellulaire immuunresponsen bij makaken. Pathogene SIVsm / E600 werd gebruikt om gevaccineerde dieren te dagen. Bescherming werd aangetoond in lage uitdagingen dosis en lage virale lading werden aangetoond in hoge uitdagingen dosis. Hij ontwikkelde ook HIV-vaccins behulp van zowel serotype 1 en 2 AAV voor vaccins bedoeld om subtype C HIV-1. Immunogeniciteitsstudies deze recombinante vaccins werden bij apen uitgevoerd. De resultaten toonden aan dat vaccin goed werd verdragen en integratie werd niet gedetecteerd. Met de hulp van IAVI, een Fase I klinische trial van rAAV / HIV-1 in menselijke werd in december 2003 gestart en nu volledig werd ingeschreven in België en Duitsland.

Dr. David Knipe, Harvard Medical School

David Knipe gaf een overzicht van de constructie van replicatie-competent en replicatie-defecte maar latency bevoegde HSV-1 vectoren die SIV env, SIV envelop + gag / pol en SIV env + nef uiten.

* Vector d 106 (HSV-1) is ontworpen om de toxiciteit geassocieerd met HSV infectie volledig te elimineren. Expressie van alle 5 van de intermediaire vroege gen (IE) werd opgeheven. Dit zijn de geïnfecteerde cel polypeptiden (ICP) 0, 4, 22, 27 en 47 en is aangetoond dat regulerende functies die de gecoördineerde expressie van het HSV genoom beïnvloeden. ICP4 en ICP27 zijn absoluut essentieel voor de replicatie van het virus. De functie van ICP47 belangrijker zijn in vivo, waar het blokkeert de presentatie van antigene peptiden aan CD8 + cellen en kan helpen het virus ontsnappen immune surveillance.

Gegevens bleek ook een replicatie-mutant kandidaat genitale herpes vaccin (HSV-2 dl5-29) .; In een cavia model zag hij

Dr. Ronald Desrosiers, Harvard Medical School

Dr. Ronald Desrosiers gepresenteerd op recombinant herpesvirus vectoren met de nadruk op rhesus rhadinoviruses (RRV) en rhesus lymfocryptovirus (LCV) en hun potentieel in diermodellen voor KSHV en EBV, respectievelijk. Hij heeft ook gepresenteerd op een enkele cyclus SIV-infectie systeem.

Voordelen van Herpes virussen als vectoren

Potentiële voordelen van KSHV (Kaposi-sarcoom-geassocieerd virus) -HHV-8 als vector

Potentiële voordelen van rhesus rhadinoviruses (RRV) als een diermodel (RRV is een nauwe verwant van KSHV / HHV-8)

Rhesus lymfocryptovirus (LCV) als diermodel voor EBV

SIV enkele cyclus infectie systeem; De single-cyclus SIV-infectie systeem is gebaseerd op een gag-pol-aangevuld kader shift mutant in het ribosoom slip website. De data geven aan dat ze niet verspreiden in vitro en worden snel opgelost bij dieren. Deze single-cyclus systeem genereert ook neutraliserende antilichamen reacties op SIV251 isolaat en induceert ELISPOT reacties op SIV gag peptiden. Deze mutant vermindert ook het virale setpoint in een aantal van de gewraakte dieren.

Dr. Matthias Schnell, Thomas Jefferson University

Verzwakte rabiësvirus (RV), een lid van de Rhabdovirus familie van negatieve strengs RNA virussen, biedt verschillende voordelen als potentieel vaccin vector: (1) De modulaire genoom wordt georganiseerd korte transcriptie stop / start sequenties die de genen, waardoor het relatief gemakkelijk te manipuleren. (2) Het genoom is geschikt voor grote (en meerdere) vreemde genen zonder dat virale replicatie. (3) Aangezien het genoom RNA, repliceert alleen in het cytoplasma, waardoor elke mogelijkheid van recombinatie, reversie of integratie. (4) Er verwaarloosbaar seropositiviteit voor RV in de algemene populatie verstoren vaccin “take”. (5) het virus kan niet cytopathisch in geïnfecteerde cellen tot expressie en matige tot hoge niveaus van heterologe eiwitten gedurende langere tijd. (6) verdere verzwakking van de vaccinstam van RV heeft geleid tot een aantal zeer verzwakte RV tweede generatie vectoren die niet-cytopathische, zelfs na intracraniale infectie bij muizen. (7) RV repliceert op mucosale oppervlakken, waar het mucosale immuunrespons kan opwekken.

Recombinant RV uiten van HIV-1 Gag was in staat om gag-specifieke CTL’s te genereren in muizen, en recombinante RV expressie HIV-1 env gegenereerd langdurige envelop gp160-specifieke CTL’s die in staat zijn om cross-kill doelcellen waren die verschillende (niet-vaccin ) HIV-1 envelop eiwitten. De RV-HIV-1 env vector ook gegenereerd anti-envelop bindende antilichamen in de muis studies. In een inleidende studie in vier rhesus makaken werden RV-gebaseerde vectoren weergegeven niet pathogeen en veilig zijn, zonder klinische symptomen geobserveerd. Niet-menselijke primaten geïnfecteerd met RV expressie SHIV89.6P Env en SIVmac239 Gag en gegenereerde aanzienlijke humorale immuunreacties tegen HIV-1 gp140 envelope door 4 weken na immunisering. De anti-envelop-antilichamen, hetgeen (ELISA) in 3 van de 4 dieren, nog steeds positief waren werden gestimuleerd met een tweede inoculatie van het vaccin bij 55 weken. Viraal specifieke cellulaire immuunresponsen niet sterk genoeg te detecteren na ofwel immunisatie.

Studies zijn aan de gang om de tweede generatie RV vectoren die verder verzwakte en veiliger door het toevoegen van mutaties in de camper glycoproteïne (G) gen te ontwikkelen. De verzwakte virussen goede replicatie profielen genereren cellulaire responsen in muizen, en geen dodelijke infecties bij muizen na inenting intercraniale veroorzaken. In andere studies, waarin cytolytische en niet-cytolytische versies van RV vergeleken bij muizen bleek dat beide virussen induceren vergelijkbare niveaus van cellulaire geheugen responsen, maar dat de niet-cytolytische RV geeft betere humorale immuunresponsen, waardoor het de voorkeur vector, aangezien zowel cellulaire als humorale immuniteit waarschijnlijk nodig zijn voor een effectief HIV-vaccin.

Dr. Marjorie Robert-Guroff, National Cancer Institute

Het gebruik van het repliceren van adenovirus (Ad) vectoren voor AIDS-vaccin biedt verschillende potentiële voordelen. Ad-gebaseerde vaccins induceren zowel cellulaire als humorale immuniteit en kunnen targeten mucosale inductieve sites in de bovenste luchtwegen en / of darmen, wat leidt tot de generatie van immuunresponsen op mucosale sites die doelen in HIV transmissie. De replicatie-competente vector leidt tot langdurige expressie van de ingebrachte genen, waardoor het potentieel voor een langere duur van immuunreacties, en er is een lange geschiedenis (25 jaar en ongeveer 10 miljoen doses) veiligheidsgordels met het wildtype Ad4 en Ad7 orale vaccins.

In een immunogeniciteit studie van replicerende en niet-replicerende Ad recombinanten uitgevoerd in chimpansees, de replicerende Ad5DE3 / HIVMN env / rev en de niet-replicerende Ad5DE1, E3 / HIVMN env / rev werden intranasaal toegediend aan afzonderlijke groepen van 5 chimpansees op 0 en 13 weken, en beide groepen dieren werden vervolgens gestimuleerd met HIVSF162 gp140DV2 eiwit in adjuvans MF-59 in week 37 en 49. De replicerende Ad / HIV recombinanten geïnduceerde sterkere cellulaire immuunresponsen (zoals gemeten door IFN-g uitscheidende cellen na antigeenspecifieke stimulatie), sterkere proliferatieve responsen en hogere anti-envelop antilichaamtiters dan de niet-replicerende adenovirusvectoren. Sera van sommige dieren in beide groepen waren in staat om primaire isolaten van HIV neutraliseren, de chimpansees ontvangen van de replicerende vector blijkt beter (maar niet statistisch significant) neutralisatie. Het repliceren van Ad-recombinanten waren aanzienlijk beter bij het opwekken van antilichamen die bemiddelde ADCC doden van doelcellen.

De beschermende werkzaamheid van replicatie-competente Ad vectoren werd aangetoond met behulp van Ad5 gastheerbereik mutant-SIV recombinanten voor immunisatie van rhesus makaken. In deze studie (gepubliceerd in Malkevitch et al, J. Immunol 2003;.. Patterson et al, J. Virol 2003;…. En Patterson et al, J. Virol 2004) dieren werden geïmmuniseerd met Ad-SIV recombinanten mondeling intranasaal in week 0, intrathecaal in week 12, daarna gestimuleerd met SIV envelop-eiwit of envelop peptiden intramusculair in week 24 en 36. de Ad-SIV recombinanten voor elke groep waren: (1) Ad5hr-SIVenv / rev, (2 ) Ad5hr-SIVenv / rev + gag, (3) Ad5hr-SIVenv / rev + nef, (4) Ad5hr-SIVenv / rev + gag + nef. Deze dieren werden gestimuleerd met SIVgp120 in week 24 en 36. Group (5) Ad5hr-SIVenv / rev-geïmmuniseerde dieren werden gestimuleerd met een peptide polymeer nabootsen van de CD4-bindende gebied van gp120. Alle dieren werden uitgedaagd intrarectaal met ziekteverwekkende SIVmac251 (de oorspronkelijke stam, die door R. Desrosiers). Na challenge, alle controledieren werden geïnfecteerd en vertoonden het typische patroon van SIV replicatie, acute virus piekbelastingen in het gebied van 107-109, met instelpunten op 20 weken 105 – 107. Daarentegen, 39% van de geïmmuniseerde dieren (over alle groepen) liet een sterke controle van de SIV replicatie. Acht van de 30 geïmmuniseerde dieren gecontroleerd virusreplicatie tot onder of op de drempel van detectie (6 daarvan hiertoe door 8 weken na prikkeling), en 4 van de makaken had geen detecteerbare plasmaviremie op elk moment na challenge, hoewel viraal DNA konden worden gedetecteerd. Viremie controle op setpunt werd gecorreleerd met cellulaire reacties (IFN-g ELISPOT) tegen Env en Rev peptiden, en vermindering van viremie tijdens acute infectie werd gecorreleerd met env-specifieke binding antilichamen bezitten ADCC activiteit.

Wanneer de CD8 + T-cellen van de dieren toonde setpoint controle viremie uitgeput waren met antilichaam aanzienlijk virusreplicatie verhoogd en daarna weer daalde CD8 + T-cellen werden bijgevuld, waaruit blijkt dat de controle van viremie bij dieren was geassocieerd met SIV-specifieke CD8 + T cel responsen. De bescherming van het verloop van de immunisatie was langdurig. Zonder tussenliggende immunisatie, 8 van de 11 controller dieren bleven beschermd tegen een tweede SIVmac251 uitdaging een jaar later.

Samengevat, replicerende adenovirus HIV-vaccins blijken staat tot het opwekken systemische en mucosale viraal-specifieke cellulaire en humorale immuunresponsen die krachtige en langdurig zijn en kan resulteren in controle van virusreplicatie. Dr. Guroff is van plan een Fase I menselijke immuunreacties om rAd-HIV-vaccins te evalueren, en tot oprichting van collaboratieve studies in niet-humane primaten om te proberen om het niveau van bescherming wordt geboden door deze aanpak te verbeteren.

Dr. David Strayer, Jefferson Medical College

adenovirusvectoren

Dr. Strayer is het verkennen van het gebruik van recombinante SV40 vectoren (RSV of rSV40) adaptieve immuniteit tegen HIV en SIV antigenen te genereren. Hij herinnert eraan dat beschermende adaptieve immuunsysteem correlaties zijn nog niet bekend als een optimale virale antigenen en wat testen zou voorspellen of te identificeren. Hij is van mening dat bepaalde algemene uitgangspunten misleidend kan zijn: onder meer, dat CMI (met IFNg ELISPOT lees-outs) is het belangrijkste, dat hoge niveaus van antigen voegen expressie leiden tot een betere CMI, die men nodig heeft een zeer antigeen vector, en dat de immuniteit worden bereikt met 1 of 2 inentingen. Verschillende potentiële voordelen van rSV40 vectoren werden genoemd: die bij hoge titers (≈1011 IU / ml) en gelyofiliseerd worden opgeslagen bij kamertemperatuur; transduceren meerdere immuun celtypes (macrofagen, T / B-cellen, DCs en monocyten) en snel te integreren in rust of fietsen cellen, en ondanks deze potentieel gunstige eigenschap voor antigeniciteit, hun veiligheid geschiedenis is relatief hoog (maar duidelijk nog steeds een punt van zorg); “Gutless” SV40 vectoren (zonder SV40 genen) kan dragen vreemd gen inserts tot 5 kb en worden tegen vergelijkbare titers. Dr. Strayer waargenomen dat lagere niveaus van eiwitexpressie niet noodzakelijkerwijs een nadeel voor het genereren van immuunresponsen vooral omdat de vector zelf kan relatief niet-antigeen (wekt geen neutraliserende antilichaamresponsen), en dus meerdere verhoogt met dezelfde vector zijn mogelijk (de verklaring is dat SV40 binnenkomt cellen via caveolae en een microtubuli vervoerssysteem is van virion direct naar de kern waar het binnenkomt en vn-lagen, dus bij binnenkomst, SV40 vermijdt endocytische / fagocytische paden en de capside eiwitten capside eiwitten niet tot expressie noch verwerkt zoals antigenen).

Dr. Strayer gemeld enigszins eigenzinnige maar netjes vereenvoudigd immuunreactie assays op miltcellen verkregen uit HIV-1NL4-3 en SIVmac239 env-, gag- en-tat geïmmuniseerde BALB / c muizen (bijvoorbeeld in “direct” CTL assays, stabiel gebruikte hij getransfecteerd, gekloneerd, histocompatibiliteit antigen tot expressie P815 doelwitcellen met eencellige suspensies van ongestimuleerde / ongeselecteerde effectorcellen direct toegevoegd aan 51Cr-gelabelde antigen-P815 cellen). Gegevens uit zijn lab tonen het volgende: rSV40s uiten deze HIV en SIV antigenen en immunogeniciteit resultaten zijn grotendeels vergelijkbaar met deze verschillende inserts (voor tijd redenen, geen expliciete uitdrukking gegevens werden getoond, hoewel HIV nef-getransduceerde DCs werden getoond), meerdere injecties kan stimuleren reacties, kan de immuniteit gegenereerde lange duur zijn (rSVgp120 ontlokte geheugen CMI> 1 jaar in vergelijking met HIV Env alleen), IL-12 versneld CMI, en IL-15 een versnelde ontwikkeling van het geheugen CMI, CMI reacties werden gezien ondanks BALB / c muizen die typisch zwak type 1 reacties rSVgp120 opgewekt sterkere antilichaam responsen vs. HIV gp120 envelop alleen, herhaalde inentingen van rSVgag gestimuleerd serum anti-gag antilichamen. Antilichaam data in muizen geïnoculeerd met meervoudig rSV40 HBsAg geven ondersteuning voor deze benadering (3-7 inoculaties met dezelfde rSV40 vector moesten statistisch verschillende niveaus vertonen in vergelijking met controles bij P <0,05) .; Dr. Strayer adequaat bijgeschreven zijn eigen lab medewerkers en medewerkers. Strayer lab: Hayley McKee, Sandra Calarota, Rumi Kondo, en Patricia T'sao, Feitelson Lab: Mark Feitelson en Bill Zon, Universidad de Navarra in Spanje: Maria Vera, Puri Fortes, en Jezus Prieto, theernment. Dr. William Jacobs, Howard Hughes Medical Institute Dr. Bill Jacobs voorgesteld op strategieën voor het genereren van recombinante mycobacteriële vaccins voor tuberculose, malaria en HIV. Voordelen van recombinant Mycobacteria Hij toonde veel gegevens over de reden waarom hij denkt dat een Mycobacterium tuberculosis afgeleid vaccin is veiliger en kan een betere bescherming dan BCG. Met dit doel heeft hij drie dubbele verwijderde mutante stammen van verzwakte MTB ontwikkeld, 2 non-replicating en een replicating .; Non-replicating Mutants repliceren Mutanten Als een proof of concept gegevens met de repliceren mutant mc26030 toonde hij Dr. Jacobs toonde ook aan dat de deletie van het anti-apoptotische factor NlaA dat M. tuberculosis mogelijk maakt langer macrofagen overleven, kan de immunogeniciteit van MTB verzwakte vaccins verbeteren, meer antigenen blootstelling aan het immuunsysteem. HIV toonde hij die constructen met Mycobacterium smegmatis HIV env kan uitdrukken als oppervlak, uitgescheiden of intracellulaire antigenen en ook kan worden gebruikt als een DNA toedieningsvector. SV40 virusvectoren Mycobacterium vectoren Listeria vectoren In het werk gedaan met Norm Letvin, de resultaten van een enkele dosis van DNA / DNA prime / boost experiment in muizen met behulp van een recombinant M. smegmatis HIV-1 HXBc2 gp120 tot expressie plasmide liet de minister-produceerde meer CD8 T-cel respons dan wanneer gevolgd door de boost. Er was een lichte dosis-respons effect met 108 CFU beter te zijn dan 106 CFU. In vitro resultaten via een ELISPOT-test bleek dat hetzelfde plasmide wekte een HIV-specifieke CD8 T-cel respons die 27 maal beter dan de lege vector was. In samenwerking met de hertog groep recombinant M. smegmatis uitdrukken Group M consensus (CON6) enveloppen gp120 en gp140CF werden gemaakt. Deze werden gebruikt om prime (2x dosis van 108 of 109 CFU) voor een recombinant CON6 Env rgp140CF eiwit boost (50 ug). De anti-HIV gp140 antilichaam respons was statistisch significant (p <0,05) vergeleken met M. smegmatis lege plasmide prime / rgp140CF 50 ug eiwit boost en geen proteïne boost alleen. Dr Jacobs beschreef ook zijn malariavaccin werk met recombinant BCG uiting van de PfMSP1-19 eiwit van Plasmodium falciparum. Balb / c muizen geïmmuniseerd met rBCG vertoonden antilichamen en T-celreacties op PfMSP1-19. Dr. Jacobs is van mening dat de recombinant Mycobacterium vaccins drievoudige bescherming tegen HIV, malaria en tuberculose kan leveren. Dr. Elizabeth Hohmann, Massachusetts General Hospital Kleine verkennende klinische studies kunnen gegevens over de veiligheid en immunogeniciteit die zal helpen directe klinische ontwikkeling van bacteriële vectoren zoals L. monocytogenes te bieden. Er zijn verscheidene voordelen aan het gebruik Listeria als vector: 1) bescherming wordt gemedieerd door MHC klasse-I beperkte CD8 + T-cellen in muizen, 2) wordt opgenomen door zowel macrofagen en dendritische cellen, 3) kan effectief zijn voor zowel profylactische als therapeutische toepassingen, 4) bevat geen LPS, 5) eerdere blootstelling kan geen probleem voor vaccins en 6) Listeria veroorzaakt zelden ziekte ook al aanwezig in voedsel en water. Beperkingen aan het gebruik van Listeria omvatten: 1) kan bacteriëmie en CNS infecties veroorzaken, 2) zwangere vrouwen lopen het risico van abortus, 3) HIV-patiënten lopen het risico op infectie, 4) de menselijke biologie, vergieten en immunologie zijn niet goed begrepen. Menselijke studies orale weg kan worden gebruikt om mucosale immuniteit te induceren. Seroconversie voor IgG en IgA wordt meestal gezien. Immuunreacties kan ook worden gemeten door ELISPOT. De Listeria delta-Acta / delta-InlB mutant vaccinstam infecteert fagocyten, maar niet non-fagocyten. Het wordt snel geklaard uit de lever en minder toxisch. Ze hebben een codon geoptimaliseerd HIV-Gag Steek voor Listeria gemaakt en werken aan een meer verzwakt gedood maar metabolisch actief vaccin te maken. Kortom, dit geen zeer persistent organisme er goede demping strategieën beschikbaar en menselijke studies mogelijk. Dr. Stephen Udem, Wyeth Pharmaceuticals Vesiculaire stomatitis (VSV) is een omhuld, negatieve streng RNA, snel repliceren lytisch virus dat is een klein pathogeen van vee en die zelden kunnen veroorzaken meestal asymptomatisch besmettingen van mensen. Infectie met deze virussen is beperkt tot de orale slijmvliezen en de luchtwegen. Het virus codeert voor 5 eiwitten (nucleocapside, fosfoproteïne polymerase subeenheid matrix G-eiwit glycoproteïne, en L eiwit polymerase); Deze eenvoudige genoom kunnen gemakkelijk worden gemanipuleerd om vreemde genen die robuust uitgedrukt voeren, en de genvolgorde produceren verzwakking schudden; demping kan ook worden geproduceerd door verschillende gendeleties en temperatuurgevoelige mutaties. Zelfs de verzwakte virussen lijken sterke immuunresponsen (mucosale en systemische reacties) zowel virale en opgenomen antigenen te stimuleren; en er is weinig reeds bestaande immuniteit in humane populaties. Het virus groeit efficiënt in continue cellijnen en het RNA-genoom niet recombineren evenmin integreren in het gastheergenoom. Al deze eigenschappen maken dit virus een goede kandidaat voor een vaccin vector. Met betrekking tot het onderwerp van de vergadering (persistent-vector gedreven immuniteit) is aangegeven dat, terwijl VSV induceert persisterende infectie bij insecten en sommige gemuteerde virussen kunnen hardnekkige infectie van zoogdiercellen te induceren in cultuur, geen bewijs van wild type virus persistentie in natuurlijke hosts (runderen, varkens, paarden), noch het bewijs van wt of verzwakt VSV persistentie in muizen, fretten, of NHP na hoge dosis inentingen bestaat. Echter, een vergelijkbaar negatieve-streng RNA virus, mazelen, kunnen zeldzame persistente infecties bij mens (die ernstige gevolgen omdat de neurotrofe aard van mazelenvirus) veroorzaken; Deze persistentie lijkt bij proefdieren worden versterkt door mutaties die de productie van infectueuze virusdeeltjes (waaronder mutaties in het mazelen matrix gen analoog aan de VSV matrix gen of de F en H eiwitten die bepaalde analogie met het VSV G eiwit) verminderen . Zo kan het mogelijk zijn persistente VSV vectoren maken door mutatie M of G-eiwitten. Dergelijke defecte virussen kan gemakkelijk worden vermeerderd door complementatie in een verpakking cellijn. De potentiële voordelen van persistente VSV vectored vaccins omvatten: langdurige immuunrespons en de veiligheid geen integratie vector. Het is echter niet duidelijk of persistente blootstelling aan vector en insert antigenen de meest geschikte immuunresponsen induceert en of persistente infectie kan worden gecontroleerd beperkend duur en verspreiding, of wat zijn de gevolgen op lange termijn van persistente VSV infectie. Dr. Haynes bedoelde groep aan een grafiek (bijlage 1) een samenvatting van 6 belangrijkste kenmerken van elk van de 12 vectoren in deze vergadering aan bod, met vermelding van de huidige hiaten in de kennis. De kenmerken zijn de volgende: het verschaffen van een aanhoudende immuunrespons; beïnvloed door de reeds bestaande immuniteit; geschikt als een prime-vaccin; geschikt als een boost; het verstrekken van mucosale immuniteit van mucosale immunisatie; en het verschaffen van mucosale immuniteit systemische immunisatie. De leden van de groep beoordeeld de voorwaarden en antwoordde 'ja', 'nee' of 'onbekend' voor elk. Over het algemeen, de grafiek bleek een groot aantal onbekenden, met vermelding van de behoefte aan onderzoek op vele gebieden. Gezien de portfolio van vectoren momenteel ondersteund door DAIDS, de WG aanbevolen dat DAIDS overwegen ondersteuning van veelbelovende vector systemen die op dit moment niet worden gesteund aanzienlijke DAIDS ', met inbegrip van rAAV en replicatie-competent adenovirus vectoren. De WG was ook geïnteresseerd in het horen van updates op andere veelbelovende vector systemen die niet op de workshop, waaronder poliovirus en mazelenvirus vectoren werden gepresenteerd. Vesiculaire stomatitis Workshop Discussie en Aanbevelingen